今日通用引物怎么使用（通用引物）

大家好，小康来为大家解答以上问题。通用引物怎么使用，通用引物很多人还不知道，现在让我们一起来看看吧！

通用引物，是指克隆位点两侧的序列匹配，旨在提取DNA片段，主要用于测序。序列特异性引物是指检测基因突变的方法。

通用引物通常匹配载体多克隆位点两侧的序列，或者匹配载体中的一些起始和终止元件。这样，无论什么样的DNA片段被插入到载体中，它都可以被通用引物通用引物扩增出来用于测序，但它只是“万能的”而不是万能的。

序列特异性引物使用两个等位基因特异性寡核苷酸(ASO)引物进行点突变(其中一个标记为A和B ),另一个通用引物(C)形成引物系统；当引物延伸时，A和B同时竞争靶序列上的同一个复性位点。扩增反应后，通过凝胶电泳和放射自显影，膜上可见的条带就是同位素标记引物扩增的产物。

扩展信息：

设计要求

做Real Time的时候，SYBR Green I法用的一对引物和一般PCR用的不一样，引物设计中需要的参数也不一样。底漆设计的要求：

1.避免重复碱基，尤其是g。

2.Tm=58-60度。

3、GC=30-80%。

4，3’端最后5个碱基不能超过2 G或C。

5.正向引物越靠近探针越好，但它们不能重叠。

6.PCR扩增产物长度：引物的产物大小不宜过大，一般80-250 BP；80 ~ 150 BP最合适(可以扩展到300 bp)。

7.引物的退火温度要高，一般在60度以上；

要特别注意避免引物二聚体和非特异性扩增的存在。

此外，引物设计应考虑到引物应具有不受基因组DNA污染影响的能力，即引物应穿过外显子，优选穿过外显子的连接区，以便能更有效地保护其免受基因组DNA污染。

染色法的关键是找到合适的底漆，防止污染。对于引物，你要做好心理准备，从大量的引物中挑选一到两个可用的引物——找到合适的引物并不容易。

参考来源：百度百科-入门

参考来源：百度百科-通用引物

参考来源：百度百科-序列特异性引物

本文到此结束，希望对大家有所帮助。

　　免责声明：本文由用户上传，与本网站立场无关。财经信息仅供读者参考，并不构成投资建议。投资者据此操作，风险自担。 如有侵权请联系删除！