质粒转染步骤(质粒转染)

时间:2024-04-23 21:00:14 来源:
导读 今天之间网归一为大家解答以上的问题。质粒转染步骤,质粒转染相信很多小伙伴还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、两者在本质上并没有区别...

今天之间网归一为大家解答以上的问题。质粒转染步骤,质粒转染相信很多小伙伴还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、两者在本质上并没有区别。

2、无论是质粒转染,还是病毒转染,均是真核细胞主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。

3、随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。

4、在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。

5、随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。

6、转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。

7、电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。

8、扩展资料:转染的原理:外源基因进入细胞主要包括电击法、磷酸钙法、脂质体介导法和病毒介导法。

9、电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞;病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。

10、但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大;病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响;所以现在对于很多普通细胞系,一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。

11、利用脂质体转染法最重要的就是防止其毒性,因此脂质体与质粒的比例,细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题,通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。

12、参考资料来源:百度百科-转染参考资料来源:百度百科-细胞转染。

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